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　　1、從液氮中取出凍存的試驗用宿主細胞，在37℃溫水中迅速融化，用毛細吸管移植于含有細胞維持液的細胞管內，吹吸數次，使混勻,立即離心(3000r/min，3min)，去上清液。再加入適當的細胞維持液，吹吸數次，使混勻，同上離心后，轉種于加有10培養基的培養瓶中。逐日觀索細胞生長情況，在細胞長滿單層時，用于消毒試驗。

 

　　2、取出低溫凍存的試驗病毒毒種，37℃水浴融化，用細胞維持液作10倍稀釋，然后接種于已經長滿單層細胞的細胞瓶內，置37℃溫箱中，使與細胞吸附、生長。逐日觀察病變，待3/4細胞出現病變時，收獲病毒。

 

　　3、將含有病毒及宿主細胞的培養液，在冰浴條件下，用超聲波(或反復凍融)破碎宿主細胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000/min,15min)去除沉淀(主要為細胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1.0分裝于無菌離心管(1.5)中。

 

　　4、取1支病毒懸液，按病毒滴度測定法，測定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80℃備用。

 

 

　　1、破壞包膜：包膜含有脂類物質，因之有包膜的病毒可以很快速的被脂溶劑破壞，如氯仿或去氧膽酸鈉可以使病毒滅活。實際上可以利用病毒對脂溶劑的敏感性來檢查病毒是否有包膜。物理因子，如滲透壓改變、凍融、熱和干燥等都可以引起包膜破壞。一般認為，呼吸道感染的病毒對于燥抵抗力弱，傳播主要是人間直接感染，這是因為有包膜的緣故。

 

　　2、病毒蛋白質變性：能使蛋白質變性的化學制劑都能使病毒滅活，如酚、次氯化物、酸和堿等。加熱引起變性也是有效滅活的方法。一般說病毒對熱抵抗力弱，60℃幾分鐘就使之感染性明顯降低，因此在分離病毒時，從患者取來的標本需低溫保存，迅速送往實驗室，長期保存置于-80℃以下的低溫條件。

 

　　3、病毒核酸的損害：y線等電離輻射可以切斷核酸，紫外線可以使核苷酸鏈上相鄰的嘧啶堿基形成二聚物，而破壞病毒基因的功能。另外吖啶橙或中性紅等染料可以和病毒核酸結合，暴露在光線之下，可以使核酸分解，從而使病毒滅活。

 

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